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Hoechst 33258染色液(1mg/ml)使用說明書
【產品組成】
Component | SBJ-1804S | Store at |
Hoechst 33258染色液(1mg/ml) | 1ml | -20℃,避光 |
【保存條件】
—20℃,避光,12個月
【產品概述】
Hoechst 33258 也稱 bisBenzimide H 33258或HOE 33258 ,分子式為C25H24N6O · 3HCl。Hoechst 33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低,常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也用于普通的細胞核染色、DNA 染色。Hoechst 33258 染色液是濃縮的儲存液,稀釋后使用,一般推薦工作濃度為 1~5μg/ml,用于固定細胞或組織的細胞核染色。
【使用方法】
(一)固定的組織細胞染色
1、根據實驗具體要求,用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度,即為Hoechst 33258染色工作液。細胞核染色時,一般推薦工作濃度為1~5μg/ml。
2、于細胞或組織樣品,固定后沖洗去除固定劑。如果需要進行免疫熒光染色,則*行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33258染色,如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的Hoechst 33258染色。
2、室溫放置,輕輕吸除Hoechst 33258染色液。
4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次,每次3~5min。
5、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。
(二)活細胞染色
1、根據實驗具體要求,用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度,即為Hoechst33258染色工作液。細胞核染色時,一般推薦工作濃度為1~5μg/ml。
2、取96、24、6孔板培養細胞至合適狀態,按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、
6孔板加入1ml的比例,加入適當的Hoechst 33258染色液,染液必須充分覆蓋細胞。
3、在適宜于細胞培養的條件下培養。
4、輕輕吸除Hoechst 33258染色液。
5、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次。
6、進行熒光檢測。
【注意事項】
1、Hoechst 33258染色液(1mg/ml)應稀釋至合適的濃度后使用。
2、熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測。活細胞或組織染色后宜立即觀察。
3、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4、避免反復凍融,否則容易失效。
5、Hoechst 33258對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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