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技術文章

冬蟲夏草的配方

閱讀:1134          發布時間:2010-9-14

         冬蟲夏草是一種真菌,它主要寄生于活動的昆蟲體內進行有機質的分解碳源、氮源和無機鹽內等營養物質。人工栽培時必須合理地配制這類營養成份,才能滿足它的生長要求。現篩選了以下幾種zui適宜冬蟲夏草菌絲生長的原料及配方如下:

   一、母種制作 培養基配方:

  1、馬玲薯200克(煮汁)、葡萄糖20克、瓊脂20克、磷酸二氫鉀1克、*1克、蛋白胨1克、牛肉膏0.5克、水1000ml。

  2、蛋白胨1克、葡萄糖20克、酵母膏1克、磷酸二氫鉀1克、*1克、VB11克、VB121克、瓊脂20克、 水1000ml。

  3、豆芽500克(煮汁)、白糖20克、瓊脂20克、磷酸二氫鉀1克、*1克、蛋白胨0.5克、水1000ml。將上述配方任選一組,按其它母種制作常規方法操作,分裝于180×18試管的1/5,高壓滅菌1.5磅維持30分鐘,制成斜面培養基備用。

  接種:待斜面培養基表面余水干后,放入無菌接種箱內接種,將分離的純冬蟲夏草母種挑取黃豆大一塊放入斜面培養基上,每支母種可接10~15支,但母種的傳代不超過二次,否則失去感染力。

  培養:接種后,放置15~18℃條件下恒溫培養。三天后菌絲開始萌發,淡黃色而旺盛的絨毛團菌絲向四周蔓廷,七天左右菌絲表面可產生子座(即草),這種草雖然沒有蟲的寄主,它的營養成份與冬蟲夏草*一致,正常情況下10天左右菌絲可長滿斜面培養基。

  二、液體種制作 培養基配方:

  1、米湯(大米煮至半熟過濾)500ml、葡萄糖5克、磷酸二氫鉀1克、*1克、蛋白胨1克、牛肉膏1克、 VB11克、VB121克 。

  2、面湯(煮面條后的湯)500ml、白糖5克、蛋白胨1克、牛肉膏1克、*1克、酵母膏1克、 磷酸二氫鉀1克 。

  3、清泉水500ml、葡萄糖10克、蛋白胨2克、牛肉膏2克、磷酸二氫鉀2克、*2克、 VB12克、VB122克 。 將配好的營養液裝入500ml的三角瓶內,每瓶裝150ml,瓶口塞上棉塞,高壓滅菌1.5磅30分鐘。 接種培養:冷卻后,放入接種箱內無菌操作,將母種培養基取手指頭大一塊放入液體瓶中,每支母種可接5-10瓶,置20~25℃條件下先靜置培養三天,然后再同樣溫度下放入搖床振動培養,若沒有搖床,每天把液體瓶用手搖3-5次,每次3-5分鐘,經過10-15天的培養即成為液體種。 如果栽培量大,液體種不夠的情況下,應根據生產量還可將液體種擴制液體種2-3次(級),無論哪級液體種都可用于直接栽培冬蟲夏草,但母種或液體種傳代過多會影響效果。液體種不宜存放時間過長,一般在低溫或避光條件下不超過一個月使用效果較好,是在栽培季節前制作液體種。

  檢驗液體種是否培養成功:

  方法是經過10-15天恒溫和振動培養,從色澤上看沒有明顯變化,只有在停止振動三天后,液體表面逐漸出現黃白色菌絲,無任何異色現象,可證明液體種已培養成功,隨著時間長久液體表面形成一層很厚的菌皮,在栽培使用時必須去掉表面這層過厚的菌皮利用清液。

  三、固體菌種制作

  冬蟲夏草的栽培一般是使用液體菌種,固體菌種還可以試測蟲草子座能否生長,也可以用固體培養基或PDA培養基直接栽出蟲草,它在大米等固體培養基上或桑蠶上都能長出子座,在適宜的昆蟲體上噴入液體種就能長出冬蟲夏草。

  培養基配方

  1、將大米用水煮至半生過濾,裝入罐頭瓶內,用牛皮紙或塑料薄膜封口滅菌。

  2、活玉米或活小麥直接裝入罐頭瓶內(若干品必須浸泡12小時以上)封口滅菌。

  3、棉殼95%、米粉3%、黃豆粉2%、含水量60%,裝瓶滅菌。在1.5磅壓力下60分鐘,或常壓滅菌100℃保持5-6小時,冷卻接種。

  接種:在接種箱內無菌操作,無論固體母種或液體種都可接入固體培養基。母種可挑取培養基手指頭大一塊放在固體培養基表面,也可以用接種針沾取菌絲在固體培養基中攪拌均勻。液體種接種是將種液滲入固體培養基中搖勻,每瓶用種量不超過5ml。

  培養:固體種需在15~18℃的暗光條件下培養,用液體種接的只需15-20天菌絲可長滿瓶,用固體母種接的需要一個月時間菌絲才能長滿瓶。

 

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